實(shí)驗(yàn)室常用離心機(jī)介紹
轉(zhuǎn)子：角式與水平式轉(zhuǎn)子，角式常用于沉降離心，水平式還常用于梯度離心。
離心原理：利用轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)時(shí)所產(chǎn)生的強(qiáng)大離心力，加速顆粒的沉淀速度，把樣品中不同沉降系數(shù)或浮力密度的物質(zhì)分離開。
實(shí)驗(yàn)室常用離心機(jī)離心方法：
(1)差速離心法:定義，應(yīng)用于沉降系數(shù)相差一~幾個(gè)數(shù)量級顆粒的分離。
缺點(diǎn)：a.分離效果差,不能一次得到純顆粒,經(jīng)再懸浮和再離心(2~3次),才能得到較純的顆粒。
b.壁效應(yīng)嚴(yán)重,在離心管一側(cè)會(huì)出現(xiàn)沉淀。
c.顆粒被擠壓,可能變形,聚集而失活。
?。?）梯度離心：定義,應(yīng)用于相差較少(20%或更少)或分子量相差三倍的蛋白質(zhì)。
優(yōu)點(diǎn)：a.分離效果好，可一次獲得較純顆粒。
b.適應(yīng)范圍廣,能象差速離心法一樣分離具有沉降系數(shù)差的顆粒,又能分離有一定浮力密度差的顆粒。
c.顆粒不會(huì)擠壓變形。
缺點(diǎn)：離心時(shí)間較長；需要制備梯度；操作嚴(yán)格，不易掌握。
常用的密度梯度離心方法有：蔗糖密度梯度離心；氯化銫等密度梯度離心。
實(shí)驗(yàn)室常用離心機(jī)使用時(shí)應(yīng)注意事項(xiàng)：
(1).離心機(jī)要置水平位置,以保證旋轉(zhuǎn)軸垂直地球水平面。
(2).使用前應(yīng)檢查套環(huán)是否平衡(臺(tái)稱)。
(3).離心杯及其外套(離心管套)是否平衡(臺(tái)稱)。
(4).樣品傾入離心杯后應(yīng)與離心管套一起兩兩平衡，平衡后把它們放置于轉(zhuǎn)子的對稱位置。
(5).蓋好蓋子,打開電源開關(guān),調(diào)整離心時(shí)間。
(6).啟動(dòng)離心時(shí)轉(zhuǎn)速應(yīng)由小至大,緩慢升速(一般要2~3min)。
(7).達(dá)到預(yù)定轉(zhuǎn)速后再調(diào)整離心時(shí)間至預(yù)定時(shí)間(10min)。
(8).離心完成后要調(diào)整調(diào)速連桿至零位,同時(shí)關(guān)上電源。
(9).要等到轉(zhuǎn)速為零時(shí)才能打開離心機(jī)蓋,取出樣品。
在線客服